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抗氯吡脲单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA方法的建立
作者: 陆健康 艾明艳 李述刚
关键词: 氯吡脲 单克隆抗体 间接竞争ELISA
摘要:在获得高特异性抗CPPU单克隆抗体的基础上,采用活性酯法将CPPU-H1与BSA、CPPU-H2与OVA偶联制备得到免疫抗原CPPU-H1-BSA和包被抗原CPPU-H2-OVA;用CPPU-H1-BSA对小鼠进行免疫,通过杂交瘤技术筛选获得了1株抗CPPU单克隆抗体的杂交瘤细胞株B7B6 24.经过体内诱生腹水法制备抗体,测定抗体亚类为IgG1,效价为1:32 000.通过对试验条件的优化,建立了一种检测CPPU的方法,该方法IC50值为3.89 ng/mL;该抗体与四螨嗪、赤霉素、噻苯隆几乎不存在交叉反应;利用所建立的间接竞争ELISA法对葡萄样品进行检测,平均加标回收率为91.4%~112.4%,变异系数为5.9%~14.4%.本研究所建立的间接竞争ELISA方法具有低成本、高准确性和高灵敏度的特点,可以用来对葡萄中的CPPU残留情况进行检测.
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