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球形芽孢杆菌C3-41菌株铵盐利用特性及铵转运蛋白质分析
作者: 梁运改 江莹 金琪 蔡亚君
关键词: 球形芽孢杆菌(Lysiniacillus sphaericus) 铵盐 铵转运蛋白质 活性 氮代谢
摘要:对球形芽孢杆菌(Lysiniacillus sphaericus)C3-41在不同铵盐浓度中的生长进行了研究. 结果表明,在铵盐浓度为0.5~4.0 g/L范围内时,菌株正常生长并形成毒素,但是芽孢形成时间随铵盐浓度的升高而提前. 从该菌株中提取基因组DNA,通过PCR的方法克隆了其基因组中疑似铵转运蛋白质的编码基因amt基因序列 (GeneID: 501248970). 为了研究amt基因在T7启动子启动下的表达, 构建了表达质粒pETAMT并转化进大肠杆菌中,对得到的重组菌株进行活性分析. 结果表明,重组菌株E-pETAMT与对照菌株E-pET28a相比具有明显的将铵盐转运进细胞内及将铵盐分泌到细胞外的活性,即表明该amt基因编码的蛋白质在重组菌株E-pETAMT中表达并表现出铵转运蛋白质的活性. 通过KEGG软件对C3-41菌株氮代谢途径的分析表明,铵盐既用于其氨基酸的合成,也是部分氨基酸的代谢产物.
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